انتقال ژن های زنجیره سبک و سنگین رمز کننده آنتی بادی trastuzumab به توتون (nicotiana tabacum l.) بواسطه agrobacterium tumefaciens
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی
- نویسنده مریم احساسات وطن
- استاد راهنما مراد جعفری رضا درویش زاده
- سال انتشار 1393
چکیده
سرطان یکی از علل مهم منجر به مرگ در سراسر جهان، به ویژه در کشورهای در حال توسعه است. سرطان سینه شایع ترین نوع سرطان در میان زنان است، و سالانه بیش از نیم میلیون زن مبتلا به این بیماری می شوند. trastuzumab (با نام تجاری herceptin) یک آنتی بادی مونوکلونال انسانی شده مشتق از تکنولوژی dna نوترکیب است که در درمان سرطان متاستاتیک سینه مورد استفاده قرار می گیرد. با این حال، یک دوره درمان با trastuzumab هزینه بسیار زیادی داشته و یک دوره درمان یک ساله برای یک بیمار نیاز به صرف هزینه بالای 70000 دلار دارد. "کشاورزی مولکولی" به عنوان یک روش امیدبخش با مزایای قابل توجه از نظر هزینه و ایمنی نسبت به سایر سیستم های بیان یوکاریوتی شناخته شده است. در این تحقیق امکان بیان آنتی بادی trastuzumab توسط بیان پایدار به واسطه a. tumefaciens و بیان موقت مبتنی بر جمینی ویروس در گیاه توتون (n. tabacum) بررسی شد. آنالیز لکه گذاری سادرن درج ژن های hc و lc آنتی بادی trastuzumab را در ژنوم گیاهان تراریخته تایید نمود. بیان تراژن ها در سطح rna با آنالیز rt-pcr نیمه کمّی مورد تایید قرار گرفت. تجمع پروتئین در گیاهان با آنالیز لکه گذاری وسترن مشخص شد و محتوی آنتی بادی در گیاهان تراریخته 1/0 درصد و در سیستم بیان موقت 65/1 درصد پروتئین کل محلول (tsp) برآورد شد، که تقریباً 5/16 برابر سیستم بیان پایدار بود. آنالیز ایمونوبلات عصاره خام گیاهان نشان داد که trastuzumab در گیاهان به شکل تترامر (h2l2) تجمع می یابد. وراثت پذیری تراژن ها در گیاهان ترارایخته نسل t1 به وسیله آنالیز pcr مورد تایید قرار گرفت. این مطالعه بیان سطح بالای trastuzumab در گیاه توتون با استفاده از یک سیستم شاتل وکتور مبتنی بر جیمینی ویروس را ثابت نمود. نتایج این تحقیق نشان می دهد که گیاهان می توانند به عنوان یک سامانه جایگزین برای تولید مقرون به صرفه پروتئین های دارویی با ارزش بالا مورد استفاده قرار گیرند. این مطالعه، برای اولین بار، اولین گام اساسی به سمت تولید trastuzumab مبتنی بر سیستم گیاهی را در داخل کشور ترسیم کرد.
منابع مشابه
انتقال ژن رمز کننده mannitol-1-phosphate dehydrogenase به چغندرقند بواسطه agrobacterium tumefaciens
تنش های غیرزیستی، به ویژه شوری و خشکی علل اصلی کاهش محصول در جهان می باشند. این تنش ها شدیداً بر عملکرد چغندرقند و کیفیت آن تأثیر می گذارند. ثابت شده است که مانیتول نقش محوری در تعدیل تنش های اسمزی و شوری در گیاهان دارد. ژن mtld آنزیم مانیتول-1- فسفات دهیدروژناز را رمز می کند که این آنزیم بیوسنتز مانیتول را کاتالیز می نماید. در این تحقیق از دو ژنوتیپ دیپلویید چغندرقند sbs1-4 و sbs1-5 برای تراریخ...
15 صفحه اولانتقال سازه pBI121:AtEXPA1 به گیاه توتون(Nicotiana tabacum)
اکسپنسین ها یک نوع پروتئین سست کننده دیواره سلولی هستند که قادرند انبساط دیواره سلولی را در روش های وابسته به pH بدون هیدرولیز اجزای اصلی ساختار دیواره سلولی، واسطه کنند. ژن AtEXPA1 آرابیدوپسیس بطور اختصاصی در سلول های روزنه بیان شده و رفتار روزنه ای را کنترل می کند. هدف از این مطالعه انتقال ژن AtEXPA1 آرابیدوپسیس به گیاه توتون و بررسی اثر آن روی فنوتیپ گیاهان بدست آمده بود. از روش تراریختی به ...
متن کاملانتقال ژن AtEXPB2 به گیاه توتون (Nicotiana tabacum) با هدف افزایش تحمل به تنش خشکی
تقسیم و توسعة یاختهای دو فرایند اصلی در رشد گیاه بهشمار میآیند. پروتئینهای اکسپنسیندر فرایند توسعة یاختهای نقش کلیدی دارند. این پروتئینها با فعالیت غیرآنزیمی در بسیاری از فرایندهای رشد و نمو گیاهی نقش دارند. یکی از نقشهای عنوانشده برای این پروتئینها، تأثیر در افزایش تحمل گیاه به خشکی است. ژن EXPB2 یکی از ژنهای خانوادة اکسپنسین است که بیشتر در بافت ریشه بیان میشود، هدف از این تحقیق ان...
متن کاملبیان دو سیسترونی ژنهای رمز کننده آنتیبادی مونوکلونال trastuzumab در توتون با استفاده از یک توالی جایگاه میانی ورود ریبوزوم
آنتیبادیهای مونوکلونال هترودایمرهای متشکل از چهار زنجیره پپتیدی، دو زنجیره سبک (L) یکسان و دو زنجیره سنگین (H) یکسان هستند. بیان همزمان مقدار برابر ژنهای رمز کننده برای تولید پایدار و گردایش به صورت یک آنتیبادی کارکردی ضروری است. به منظور بیان همزمان چندین ژن، سیستمهای مختلفی از جمله وکتورهای مبتنی بر جایگاه میانی ورود ریبوزوم (IRES) توسعه یافتهاند. در مطالعه حاضر، یک حامل دیسیسترونیک ب...
متن کاملانتقال سازه pbi121:atexpa1 به گیاه توتون(nicotiana tabacum)
اکسپنسین ها یک نوع پروتئین سست کننده دیواره سلولی هستند که قادرند انبساط دیواره سلولی را در روش های وابسته به ph بدون هیدرولیز اجزای اصلی ساختار دیواره سلولی، واسطه کنند. ژن atexpa1 آرابیدوپسیس بطور اختصاصی در سلول های روزنه بیان شده و رفتار روزنه ای را کنترل می کند. هدف از این مطالعه انتقال ژن atexpa1 آرابیدوپسیس به گیاه توتون و بررسی اثر آن روی فنوتیپ گیاهان بدست آمده بود. از روش تراریختی به ...
متن کاملتراریختی چغندرقند با ژن فلاودوکسین (fld) سیانوباکتری بواسطه agrobacterium tumefaciens
تنش های اکسیداتیو و اسمتیکی معمولا با بسیاری دیگر از تنش های مختلف غیرزیستی همراه می باشند که بطور قابل توجهی در آسیب رساندن به گیاهان تحت شرایط تنش دخالت دارند و چغندرقند نیز از این مساله مستثنی نمی باشد. بین مسیرهای متابولیکی و رشد و نموگیاهی و همچنین پاسخ به تنش های مختلف، درجه خاصی از همپوشانی و تداخل وجود دارد. این مشاهدات امکان دستیابی به منابع مختلف مقاومت به تنش را، تنها از طریق یکبار ت...
15 صفحه اولمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023